湖北白猪CD154基因的克隆及表达

作者：袁明涛; 肖少波; 方六荣; 方亮; 陈焕春

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2007, (05): 423-425.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.004218

• 湖北白猪
• CD154
• 克隆
• 表达

目的克隆湖北白猪CD154基因,并在大肠杆菌及HeLa细胞中表达。方法利用RT-PCR方法从湖北白猪外周血单核细胞中扩增出猪CD154基因的完整编码区,进一步PCR扩增获得缺失信号肽、跨膜区的截短型CD154,将其克隆至原核表达载体pQE-80L的6×His下游,获得原核表达质粒pQE-tCD154,转化大肠杆菌DH5α进行诱导表达。同时,将完整CD154基因克隆至真核表达载体pEGFP-C1的EGFP基因下游,获得融合蛋白表达质粒pEGFP-C1-CD154,转染HeLa细胞进行表达。结果原核表达质粒pQE-tCD154,转化大肠杆菌DH5α诱导表达出相对分子量(Mr)为29000的融合表达...

• 单位
  农业微生物学国家重点实验室; 华中农业大学