重组酶快速检测虾血细胞虹彩病毒方法的建立

作者：尹伟力; 吴葳; 张四化; 马晓玲; 韩伟; 吴宁宁; 陈燕平

来源：水产科学, 2020, 1-6.

DOI：10.16378/j.cnki.1003-1111.19235

• 虾血细胞虹彩病毒
• 重组酶聚合酶扩增技术
• 快速检测 Shrimp hemocyte iridescent virus(SHIV)
• recombinase polymerase amplification
• rapid detection

为建立虾血细胞虹彩病毒的快速检测方法,根据虾血细胞虹彩病毒的ATP酶基因(ORF114R)保守序列设计特异性引物,通过条件优化,建立基于重组酶聚合酶扩增技术的虾血细胞虹彩病毒检测方法。重组酶聚合酶扩增技术的最优扩增温度为30℃,恒温反应20min内即可完成。特异性试验结果显示,该方法与其他常见虾类感染病毒无交叉反应。敏感性试验结果显示,该方法对虾血细胞虹彩病毒的最低检出限为7拷贝/μL,低于传统的巢式PCR方法。利用已建立的重组酶聚合酶扩增技术方法和PCR方法对采集的509批临床样品进行检测,试验结果表明,重组酶聚合酶扩增技术能够有效检出PCR方法的弱阳性样品,表明重组酶聚合酶扩增技术可以用于...