基于猪流行性腹泻病毒S1蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立及初步应用

作者：罗烨; 罗灵芝; 丁彦彬; 赵墩; 周小飞; 郑金; 李润成; 葛猛; 余兴龙^*

来源：中国兽医科学, 2020, 50(11): 1341-1347.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0190

• 猪流行性腹泻病毒
• S1蛋白
• ST细胞
• 间接ELISA

根据猪流行性腹泻病毒(PEDV)HuN株S1蛋白的基因序列(GenBank:JQ517274)构建哺乳动物细胞重组表达质粒pIRES-S1。利用电转法将pIRES-S1转染至ST细胞,经过G418加压筛选、Western-blot检测、悬浮驯化后,得到能表达S1蛋白的ST稳转细胞池。Western-blot结果显示,S1蛋白具有良好的反应原性。以S1蛋白作为包被抗原初步建立间接ELISA方法,并对PEDV临床血清和进口种猪PEDV阴性血清进行检测,以血清中和试验为标准,结果显示,该ELISA方法敏感性为96.3%,特异性为97.7%,与血清中和试验具有很高的一致性(kappa值=0.882,P<0.05)。应用ELISA方法对PEDV返饲猪跟踪血清检测,结果显示,该方法能准确地评估感染猪体内PEDV IgG抗体水平消长规律。上述结果表明,本研究建立的基于S1蛋白的ELISA方法具有高敏感性和高特异性,可用于临床猪血清中PEDV抗体的检测,为猪群PEDV的免疫评估提供有效依据。

• 单位
  湖南农业大学; 湖南康保特生物科技有限公司