基因局部改组技术在ubiA基因突变中的应用

作者：顾超; 傅楠; 叶江; 张惠展

来源：微生物学报, 2011, (04): 532-537.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.2011.04.017

• ubiA基因
• 辅酶Q
• 基因局部改组
• 温敏质粒 ubiA gene
• Coenzyme Q
• local DNA shuffling
• temperature sensitive plasmid

辅酶Q(coenzyme Q,CoQ)作为线粒体呼吸链中的递氢体具有较高的学术及应用价值。由ubiA基因编码的4-羟苯甲酸聚异戊二烯转移酶(UbiA)是大肠杆菌CoQ生物合成途径的限速步骤,但通过系统突变对其结构进行研究鲜有报道。【目的】应用化学合成的随机序列寡核苷酸,对ubiA基因编码活性区域的DNA序列进行随机突变。【方法】以大肠杆菌MC4100的ubiA基因插入灭活突变株为受体,将化学合成的随机序列替换目标区域序列,进行ubiA基因的局部改组;最终对所得突变株的ubiA改组基因的突变序列及其功能进行对应分析。【结果】ubiA基因局部改组后经过两轮筛选,得到CoQ产量发生不同程度变化的7株...

• 单位
  华东理工大学; 生物反应器工程国家重点实验室; 生物工程学院