摘要

目的评价铁死亡在高脂高糖心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用。方法正常培养的H9c2心肌细胞, 采用随机数字表法分为3组(n=20):对照组(C组)、高脂高糖-缺氧复氧组(HFHG+H/R组)和Ferrostatin-1+高脂高糖-缺氧复氧组(Fer-1+HFHG+H/R组)。采用高脂高糖处理12 h, 随后缺氧4 h, 复氧2 h的方法制备H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤模型。Fer-1+HFHG+H/R组在高脂高糖处理同时加入铁死亡抑制剂Ferrostatin-1, 终浓度10 μmol/L。于复氧2 h时, 采用CCK-8法检测细胞活力, 2, 4二硝基苯肼显色法检测上清液LDH活性, 荧光探针DCFH-DA流式细胞术检测ROS活性, Western blot法检测心肌细胞长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、核受体共激活因子4(NCOA4)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达。结果与C组比较, HFHG+H/R组细胞活力降低, LDH活性、ROS活性、ACSL4和NCOA4表达水平升高(P<0.05), GPX4表达差异无统计学意义(P>0.05);与HFHG+H/R组比较, Fer-1+HFHG+H/R组细胞活力升高, LDH活性、ROS活性、ACSL4和NCOA4表达水平降低(P<0.05), GPX4表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论铁死亡参与了高脂高糖心肌细胞缺氧复氧损伤的过程。

  • 单位
    武汉大学人民医院