小鼠beta防御素2原核表达与抗菌作用的初步研究

作者：魏晓丽; 金一帮; 朱明; 李亮; 温浩

来源：生物技术通报, 2012, (10): 95-99.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2012.10.008

• 小鼠beta防御素2(mBD2)
• 原核表达
• SDS-PAGE
• 抑菌作用 Mouse beta-defensin 2(mBD2) Prokaryotic expression SDS-PAGE Antibacterial activity

构建小鼠β-防御素-2(mouse beta defensins 2,mBD2)原核表达质粒pET32/mBD2,进行蛋白诱导表达及纯化,测定并纯化蛋白的抗菌活性。旨在为进一步研究其生物学特性奠定基础。通过腹腔注射脂多糖(lipopoly-saccharide,LPS)建立小鼠急性时相反应,采用RT-PCR方法扩增mBD2成熟肽,经KpnI和XhoI双酶切后插入相同酶切的pET-32a(+)载体,构建的重组质粒。将鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),采用异丙基-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导融合蛋白的表达。通过镍亲和层析获得纯化的融合蛋白。将融合蛋白采用肠激酶酶切、洗脱...

• 单位
  新疆医科大学; 新疆医科大学第一附属医院