摘要
目的通过线粒体nad1和细胞核ITS1序列,对从云南省玉溪地区一女性片形吸虫病患者体内取出的2条片形吸虫成虫进行虫种鉴定,获知寄生于人体的片形吸虫种类.方法片形吸虫标本保存于75%乙醇溶液,提取全基因组DNA,PCR扩增线粒体基因NADH脱氢酶亚基1(nad1)和细胞核r DNA的第一内转录间隔区(ITS1)序列,正反引物双向测序.所测序列与Gen Bank中Fasciola属相关同源序列组成DNA数据集,进行ITS1单倍型分析和构建nad1的NJ系统发育树.结果测得片形吸虫标本的ITS1和nad1序列长度分别是422 bp和542bp.2条片形吸虫标本的nad1序列完全一致,属于F.gigantica(Fg型).但是ITS1单倍型不一致,标本YXGD01在该基因中属于F.gigantica(Fg型),标本YXGD02属于F.hepatica(Fh型).基于nad1 DNA数据集构建的NJ系统发育树,明显分为F.gigantica和F.hepatica 2个类群.结论基于线粒体nad1和细胞核ITS1序列,从云南省玉溪地区一片形吸虫病患者体内取出的2条片形吸虫属于不同类型,标本YXGD01鉴定为F.gigantica,标本YXGD02可能是F.gigantica与F.hepatica杂交生成的中间型个体,但需要更多的实验证据.
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单位基础医学院; 玉溪市人民医院; 昆明医科大学; 昆明医科大学第六附属医院