PTBP1对肝癌细胞铁死亡的影响和机制研究

作者：杨浩; 刘之谦; 毕涛; 李杰^*

来源：中国现代普通外科进展, 2022, 25(02): 85-89.

• 肝肿瘤
• 多聚嘧啶区结合蛋白1
• 铁死亡
• 多聚胞嘧啶结合蛋白1

目的：探讨肝癌细胞HepG2中多聚嘧啶区结合蛋白1(PTBP1)对铁死亡的影响及作用机制。方法：使用转染试剂增强PTBP1小干扰转染效率。沉默PTBP1后加入铁死亡诱导剂erastin,Western blot观察HepG2铁死亡通路中关键基因的表达变化，脂质过氧化物试剂盒（MDA）、铁离子检测试剂盒、活性氧检测试剂盒（ROS）检测铁死亡相关的指标，RNA免疫共沉淀（RIP）检测方法验证PTBP1的下游靶分子，Western blot、RT-qPCR验证沉默PTBP1前后多聚胞嘧啶结合蛋白1(PCBP1)的蛋白变化趋势。结果：沉默PTBP1后，erastin诱导下谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、长链酯酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、铁蛋白重链1(FTH1)表达增加。“NC+erastin”组细胞内铁离子显著高于其他各组。“NC+erastin”组脂质过氧化物水平积累最为显著。在激光共聚焦显微镜下“si-PTBP1+erastin”组与“NC+erastin”组相比，红色荧光信号强度明显减弱。流式细胞术检测显示，“si-PTBP1+erastin”组ROS水平较“NC+erastin”组下降。RIP检测发现，PCBP1富集倍数显著高于其他铁离子代谢基因；沉默PTBP1后，PCBP1表达显著下调。结论：PTBP1通过上调PCBP1，介导铁离子转运，增强铁死亡的敏感性。

• 单位
  山东第一医科大学; 滨州医学院