微小RNA-30a-5p/Ovo样锌指蛋白2轴通过Wnt/β-连环蛋白信号通路调控人恶性脑胶质瘤细胞增殖能力

作者：王振球; 马龙; 杨福伟^*

来源：中华实验外科杂志, 2021, 38(04).

• 胶质瘤
• 微小RNA
• Wnt/β-catenin信号通路
• 细胞增殖

目的探讨微小RNA(miR)-30a-5p/OVOL2轴对人恶性脑胶质瘤(HMG)U-87 MG细胞增殖能力的调控作用及信号通路机制。方法利用定量聚合酶链反应(qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)分别检测miR-30a-5p和OVOL2在HA1800和U-87 MG细胞系中的mRNA水平和蛋白水平;通过细胞计数试剂盒(CCK-8)检测抑制miR-30a-5p表达后U-87 MG的细胞增殖能力和过表达OVOL2后U-87 MG细胞的增殖能力;用qPCR和Western blot实验检测抑制miR-30a-5p表达后U87-MG细胞中OVOL2的mRNA和蛋白表达水平;通过miRNA靶基因网站预测OVOL2 mRNA的3’端非编码区(3’UTR)与miR-30a-5p的结合序列,通过双荧光素酶报告基因实验验证靶向结合关系;利用CCK-8检测下调miR-30a-5p表达的同时下调OVOL2表达后U-87 MG的增殖水平,利用Western blot检测下调miR-30a-5p表达或上调OVOL2表达后U-87 MG细胞中总β-连环蛋白(t-β-catenin)和磷酸化β-catenin(p-β-catenin)的蛋白表达水平。两组间比较采用t检验。结果在U-87 MG中miR-30a-5p表达高于HA1800细胞,而OVOL2表达低于HA1800细胞;下调miR-30a-5p的表达可以抑制U-87 MG细胞的增殖能力;上调OVOL2的表达可以抑制U-87 MG细胞的增殖能力;miR-30a-5p通过靶向抑制OVOL2的表达调控U-87 MG细胞的增殖能力;下调OVOL2的表达逆转了下调miR-30a-5p表达所导致的U-87 MG细胞增殖能力的抑制,下调miR-30a-5p或上调OVOL2的表达抑制了该细胞中Wnt/β-catenin信号通路的水平。结论 miR-30a-5p/OVOL2轴通过Wnt/β-catenin信号通路调控HMG细胞的增殖能力。