摘要
目的观察长链非编码RNA微小RNA-200c和微小RNA-141宿主基因(MIR200CHG)结合尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶(UGDH)对乳腺癌细胞侵袭的影响。方法采用RNA pull-down实验结合质谱分析MIR200CHG与UGDH之间的相互作用;用实时定量聚合酶链反应和蛋白质印迹分析MIR200CHG表达下调对UGDH mRNA和蛋白的影响;用Transwell实验分析MIR200CHG结合UGDH对乳腺癌细胞侵袭能力的影响。组间比较采用配对t检验。结果 UGDH蛋白通过肽段VLIGGDETPEGQR和LAANAFLAQR与MIR200CHG结合, 且仅在MIR200CHG正义链结合的蛋白液中检测到UGDH蛋白。下调MCF7细胞中的MIR200CHG使实验组中UGDH蛋白表达低于阴性对照组(0.38±0.09比1.00±0.03, t=11.320, P<0.01);挽救MCF7-sh细胞中的UGDH表达使实验组中发生侵袭的细胞比例高于阴性对照组(5.34±1.06比1.00±0.20, t=6.967, P<0.01), 同时实验组中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9和波形蛋白表达高于阴性对照组, 分别为(1.96±0.23比1.01±0.04, t=7.064, P<0.01)、(1.75±0.17比1.00±0.05, t=7.330, P<0.01)和(1.63±0.17比1.02±0.02, t=6.158, P<0.01)。结论 MIR200CHG可能通过结合UGDH蛋白促进乳腺癌细胞的侵袭。
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单位南京医科大学; 江苏省肿瘤防治研究所; 江苏省肿瘤医院