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摘要
为进一步提高口蹄疫灭活疫苗的免疫效果，本研究在水包油包水(W/O/W)佐剂配方上添加免疫增强剂，一种是天然化合物维生素E(VE)，另一种是人工合成的咪喹莫特衍生物(IMQ-Chol)。每种免疫增强剂设低中高三种不同剂量，加入到基础配方中制备成不同的佐剂，然后与口蹄疫灭活病毒进行配伍。观察各组疫苗的外观并检测其稳定性、黏度、粒径和多分散系数(PDI)以确定其理化性质；称量小鼠体重、检测血常规、血液生化和组织学变化来评估免疫增强剂的安全性；检测小鼠血清中的特异性抗体、抗体亚型、细胞因子水平以及小鼠脾T淋巴细胞的分化情况评价免疫增强剂对疫苗免疫效果的影响。结果显示，配制的疫苗均为乳白色W/O/W乳液，37 ℃放置9周疫苗未出现分层现象，黏度均在16 cp以下，粒径在270 nm～370 nm之间，PDI在0.34～0.42之间；不同剂量的免疫增强剂对小鼠体重没有影响(P>0.05)，血常规、血液生化及组织学切片结果表明两种免疫增强剂的生物安全性良好；添加VE或IMQ-Chol的免疫组与基础配方免疫组相比，特异性抗体水平均显著提高(P<0.01)；其中，添加高剂量VE的免疫组和添加低剂量IMQ-Chol的免疫组不仅特异性抗体水平显著提高(P<0.001)，Th1型相关分子(IgG2a、IFN-γ、IL-12)和Th2型相关分子(IgG1、IL-4、IL-6)的分泌水平也有提升(P<0.05)；这两组的CD3+CD4+ T细胞的比例分别为75.2%和77.3%，高于基础配方组的69.6%，且CD4+/CD8+比值也高于基础配方组(P<0.05)。以上结果表明，VE和IMQ-Chol这两种免疫增强剂在不影响疫苗的理化特性的同时都具有良好的安全性，并且添加高剂量的VE或低剂量的IMQ-Chol更能有效地提高口蹄疫灭活疫苗的免疫效果。
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