过表达miR-149对胃癌SGC-7901细胞干样特性和肿瘤微环境以及裸鼠成瘤的影响

作者：张小路; 杜梅红^*; 彭银杰; 万鑫; 张建刚; 岳大成; 刘新; 王世东

来源：临床肿瘤学杂志, 2021, 26(05): 404-410.

• 胃癌
• miR-149
• 乙醛脱氢酶
• SOX2
• OCT4
• NF-κB p65

目的探讨miR-149对胃癌细胞干细胞样特性、炎症反应和体内裸鼠成瘤的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-149在不同的人胃癌细胞系和健康胃上皮细胞中的表达;胃癌细胞系SGC-7901分为3组:对照组(未转染组)、miR-NC组(转染miR-NC)和miR-149 mimics组(转染miR-149 mimics序列),qRT-PCR检测miR-149的表达;CCK-8检测各组SGC-7901细胞的活力;流式分选乙醛脱氢酶(ALDH)阳性细胞;Western blotting检测SGC-7901细胞中性别决定相关基因簇2 (SOX2)和八聚体结合蛋白4 (OCT4)的蛋白表达以及NF-κB p65的磷酸化;ELISA检测细胞上清液中白细胞介素(IL)-6和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的含量。转染miR-NC和miR-149 mimics的胃癌SGC-7901细胞分别在裸鼠皮下接种,每5 d测量肿瘤体积并记录,30 d后称量瘤重量,qRT-PCR检测瘤组织中miR-149的表达;免疫组化检测瘤组织中OCT4的表达。结果与健康人胃上皮细胞GES-1比较,胃癌细胞中miR-149的表达显著下调(P<0.05)。与对照组比较,miR-149 mimics组SGC-7901细胞中miR-149的表达明显上调,细胞活力显著下降,ALDH阳性细胞数目明显减少,SOX2和OCT4蛋白表达显著下调,NF-κB p65的磷酸化水平明显降低,细胞上清液中IL-6和iNOS的含量明显降低,以上差异均有统计学意义(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-149 mimics组裸鼠移植瘤的体积和重量明显减小(P<0.05),瘤组织中OCT4阳性细胞数目明显减少(P<0.05)。结论 miR-149在胃癌中可能通过抑制干细胞样特性、细胞因子分泌和NF-κB p65的磷酸化发挥抑癌功能。

• 单位
  河南省中医院; 河南中医药大学