一种简单、极快的植物叶片DNA提取方法

作者:陈晓军; 王敬东; 宋海丽; 李树华; 樊云芳*
来源:种子, 2018, 37(11): 26-34.
DOI:10.16590/j.cnki.1001-4705.2018.11.026

摘要

为了满足分子标记辅助育种中基因型鉴定、基因克隆、测序的需要,本研究借用棉签等具吸附功能的材料代替移液器,依次直接在2种DNA提取液中操作,建立了一种简单、快速、环保的水稻叶片DNA提取方法。结果表明,提取溶液通过PCR扩增,满足基因扩增对模板的要求;同时,对其进行了灵敏度测试,稀释107倍仍然能够扩增出目标片段;最后通过PCR、克隆载体连接等分子生物学手段,验证此方法也满足测序的需要。本方法能够在90s内完成植物叶片DNA的提取,解决了目前植物基因组DNA提取方法需要离心机等昂贵特殊设备、提取步骤繁锁、提取过程中刺激味大、提取时间长等问题,有利于大规模开展分子标记辅助育种中材料基因型的鉴定,具有简单、快速、廉价、环保等优点。

  • 单位
    宁夏农林科学院枸杞工程技术研究所; 宁夏农林科学院农业生物技术研究中心; 北方民族大学

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