摘要
目的研究黄芪多糖(APS)对肝癌细胞的抑制作用及其抑制作用是否涉及自噬。方法应用克隆形成法和溴化噻唑蓝四氮唑(MTT)法检测APS对肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制作用,用流式细胞术检测APS对SMMC-7721细胞周期的影响,Western Blot法检测APS对自噬相关蛋白的表达。结果质量浓度为0.75、1.50、3.00 mg·mL-1的APS均可减少SMMC-7721的细胞克隆数,且随质量浓度的增加抑制作用明显增强;APS质量浓度梯度地抑制SMMC-7721细胞的存活率,且随着时间增加APS对SMMC-7721细胞的抑制作用也增强。APS产生作用后,S期细胞比例减少,而G0/G1期细胞比例增加。此外,3.00 mg·mL-1的APS可显著增加微管相关轻链3B(LC3B)、Beclin 1和p62等自噬相关蛋白的表达,提示APS可刺激自噬;当自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)和巴佛洛霉素A1(Baf)存在时,APS抑制SMMC-7721细胞作用消失。结论 APS对肝癌细胞SMMC-7721有显著的抑制作用,诱导细胞阻滞于G0/G1期可能是其机制之一,且其抑制作用可由自噬介导。
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单位济南市第一人民医院