牛精液中基因I型牛病毒性腹泻病毒荧光探针定量RT-PCR检测方法的建立

作者：季新成; 黄玲; 段晓东; 员丽娟; 牛国辉; 于学辉; 曾新强; 张彦明

来源：中国预防兽医学报, 2011, (01): 45-49.

• 牛精液
• 基因I型BVDV
• 荧光定量RT-PCR检测
• 血清抗体检测 Bovine semen
• genotype I BVDV
• fluorescent quantitative RT-PCR detection
• serum antibodies detection

为建立牛精液中基因I型牛病毒性腹泻病毒(BVDV-1)的快速检测方法,本研究采用Sephycral S-400凝胶对牛精液过滤处理后提取病毒核酸,根据BVDV-1 5'UTR保守区基因序列,设计特异性引物和荧光探针,通过反应条件的优化,建立了牛精液中BVDV-1荧光定量RT-PCR检测方法。该方法可以检测到牛精液中含量为0.0125 TCID50的病毒,灵敏度比病毒分离方法高200倍～2 000倍,比常规RT-PCR方法高10倍。对从同一个牛场6个月内采集的120份新鲜牛精液和40份冷冻牛精液用该荧光RT-PCR方法检测,没有检测到BVDV-1阳性样品。对其中的10头牛定期检测精液中病毒的同时...

• 单位
  新疆出入境检验检疫局; 西北农林科技大学