HBx基因对HepG2.2.15细胞MICA-A5.1表达及侵袭、迁移的影响

作者：李沛; 刘宇^*

来源：临床肝胆病杂志, 2020, 36(04): 808-812.

• 肝炎病毒,乙型
• Hep G2细胞
• 基因,MHCⅠ类

目的探究HBx基因对HepG2. 2. 15细胞侵袭、迁移及主要组织相容性复合体(MHC)Ⅰ类链相关基因A (MICA)-A5. 1表达的影响。方法体外培养HepG2. 2. 15细胞系(插入HBV全基因组并持续表达的HepG2细胞),随机分为对照组、HBx过表达质粒组、HBx空载质粒组、HBx siRNA组、HBx siRNA阴性对照组,分别转染质粒及siRNA后,以CKK-8法分别检测24 h、48 h后细胞增殖情况,筛选合适药物作用时间;以Transwell侵袭实验和细胞划痕实验检测各组细胞侵袭迁移能力;以免疫印记法检测HBx、MICA-A5. 1蛋白和上皮间质转化标志蛋白E-cadherin、Vimentin的表达;以酶联免疫吸附法检测各组细胞培养基中s MICA水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用SNK q检验。结果与对照组比较,24 h后,HBx过表达质粒组细胞活力升高,HBx siRNA组细胞活力降低,差异均有统计学意义(q值分别为8. 268、4. 365,P值分别为<0. 001、0. 036); 48 h后,HBx过表达质粒组细胞活力升高,HBx siRNA组细胞活力降低,差异均有统计学意义(q值分别为12. 680、7. 523,P值均<0. 001)。与对照组比较,HBx过表达质粒组细胞HBx、MICA及Vimentin蛋白表达、细胞培养基中s MICA水平、迁移细胞数目、侵出Transwell小室的细胞数目均升高,E-cadherin表达降低(q值分别为9. 427、6. 697、10. 500、5. 042、22. 740、15. 720、5. 258,P值均<0. 05); HBx siRNA组细胞HBx、MICA及Vimentin蛋白表达、细胞培养基中s MICA水平、迁移细胞数目、侵出Transwell小室的细胞数目均降低,Ecadherin表达升高(q值分别为8. 133、8. 828、7. 616、7. 673、5. 391、7. 694、6. 226,P值均<0. 05)。结论 HBx基因调控HepG2. 2. 15细胞MICA-A5. 1表达及侵袭、迁移,上调该基因可促进MICA-A5. 1表达,增强HepG2. 2. 15细胞侵袭转移能力。

• 单位
  南华大学附属第一医院