具胶原蛋白酶活性铜绿假单胞菌的筛选

作者：杨光垚; 谢君; 徐宁; 李灵; 张义正

来源：微生物学通报, 2004, (05): 43-48.

• 胶原蛋白酶(collagenase)
• 铜绿假单胞菌(P.aeraginosa)

从成都皮革厂等堆积废弃毛皮、皮革的场所采集土样 ,通过以明胶为主要基质培养基进行富集和初筛 ,获得 95株有明胶酶活性菌株。挑选其中 2 8株明胶酶活性较高的菌株进行牛皮消化试验 ,有 1 2株菌能在 48h内完全消化小牛皮。以III型酸溶性胶原为底物 ,测定了 1 2株菌发酵培养液中胶原蛋白酶活性 ,确认这 1 2株菌都具有胶原蛋白酶活性 ,酶活力基本相同 ,约 1 0～ 1 6U mL。经形态观察、生理生化特征分析及BIOLOG微生物鉴定仪鉴定 ,这 1 2株菌分为两类 ,分别是铜绿假单胞菌 (Pseudomonasaeraginosa)和火神发光杆菌 (Photobacteriumlogei) (结果另文发表 )。对铜绿假单胞菌产生胶原蛋白酶粗酶性质进行了研究 ,其酶活最适温度为 32℃ ,最适pH为 7 5 ,可以被金属蛋白酶抑制剂EDTA和EGTA部分抑制 ,不能被PMSF抑制。对铜绿假单胞菌产胶原蛋白酶发酵条件的研究表明 ,不仅培养基中氮源、碳源和金属离子影响产酶量 ,而且发酵工艺对胶原蛋白酶的产生也有较大影响。

• 单位
  生命科学学院; 四川大学