熊果酸通过JAK2/STAT3信号通路对子宫内膜基质细胞铁死亡的影响

作者：王聪; 门贵香; 邵帅; 马丽娜^*

来源：中华内分泌外科杂志, 2023, 17(03).

• 熊果酸
• 子宫内膜异位症
• 宫内膜基质细胞
• 铁死亡
• 迁移

目的探究熊果酸(ursolic acid, UA)对异位子宫内膜基质细胞(ectopic endometrial stromal cells, EESCs)增殖、迁移和铁死亡的影响及其作用机制。方法构建子宫内膜异位症小鼠模型, 并分离原代EESCs, 使用不同浓度(0、2.5、5、10、20、40、50、80、100、200 μmol/L)的熊果酸处理细胞;并将细胞分为Control组(正常培养)、2.5 μmol/L UA组(2.5 μmol/L熊果酸处理)、5.0 μmol/L UA组(5.0 μmol/L熊果酸处理)、10.0 μmol/L UA组(10 μmol/L熊果酸处理)、和UA+DUSP19组(10 μmol/L熊果酸+50 μmol/L的JAK2/STAT3信号通路激活剂DUSP19处理)。使用CCK-8法检测细胞存活率;使用平板克隆法检测细胞增殖;使用Transwell小室实验检测细胞迁移能力;使用试剂盒检测各组细胞Fe2+水平以及丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)含量;使用蛋白免疫印迹检测各组细胞Ki67、PCNA、CyclinD1、p-JAK2、p-STAT3、JAK2、STAT3蛋白表达水平。结果 Control、2.5 μmol/L UA、5.0 μmol/L UA、10.0 μmol/L UA组克隆数分别为:(152.22±15.47)、(121.22±11.54)、(92.00±5.54)、(66.44±6.88)个;Ki67蛋白表达量分别为:1.08±0.10、0.73±0.07、0.61±0.06、0.45±0.02;PCNA蛋白表达量分别为:0.85±0.07、0.64±0.05、0.41±0.03、0.31±0.05;CyclinD1蛋白表达量分别为:0.98±0.11、0.65±0.06、0.51±0.05、0.42±0.07;迁移数目分别为(92.78±6.27)、(62.22±2.20)、(50.22±4.59)、(39.11±4.33)个;Fe2+水平分别为:(1.06±0.07)、(1.21±0.11)、(1.33±0.08)和(1.47±0.09)μmol/g;MDA含量分别为:(0.48±0.06)、(0.65±0.07)、(0.85±0.08)和(1.03±0.11)μmol/g;ROS含量分别为(19.85±1.21)%、(24.83±2.79)%、(29.04±1.86)%、(33.87±2.45)%;SOD含量分别为:(36.41±3.56)、(31.03±2.81)、(25.63±2.84)和(19.62±1.67)U/mg;p-JAK2蛋白表达量分别为:0.85±0.10、0.75±0.06、0.53±0.05、0.31±0.03;p-STAT3蛋白表达量分别为:1.08±0.11、0.79±0.06、0.63±0.07、0.42±0.03。UA组和UA+DUSP19组的p-JAK2蛋白含量分别为:0.38±0.05、0.75±0.08;p-STAT3蛋白表达量分别为:0.46±0.04、0.80±0.03;细胞存活率分别为:(52.55±2.44)%、(82.18±4.72)%;Fe2+水平分别为:(1.57±0.06)和(1.21±0.13)μmol/g。以上指标, Control组与2.5 μmol/L UA组、5.0 μmol/L UA组、10.0 μmol/L UA组之间差异均具有统计学意义(P<0.05);2.5 μmol/L UA组、5.0 μmol/L UA组、10.0 μmol/L UA组之间差异均具有统计学意义(P<0.05);UA组和UA+DUSP19组之间p-JAK2、p-STAT3、细胞存活率和Fe2+水平差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论熊果酸可通过调控JAK2/STAT3信号通路抑制EESCs细胞增殖、迁移, 并诱导铁死亡, 进而发挥对子宫内膜异位症的保护作用。

• 单位
  临沂市人民医院