灵芝转化体系的建立

作者:孙墨可; 李晓薇; 孙晓文; 张曼; 田娟; 董玉迪; 李海燕*
来源:安徽农业科学, 2018, 46(26): 91-107.
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2018.26.028

摘要

利用TPS法提取平菇基因组,克隆甘油醛-3-磷酸脱氢酶启动子(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GPD),用GPD启动子替换原表达载体p CAMBIA1302中的35s启动子,构建p CAMBIA1302表达载体,利用PEG法转化灵芝原生质体。通过酶切验证与测序结果表明GPD启动子已成功构建到表达载体p CAMBIA1302中,通过灵芝转化子的PCR检测和荧光显微镜观察证明绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)已转入到灵芝中。该研究成功构建了灵芝转化体系,对今后开展灵芝的分子生物学研究具有重要意义。

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