荧光定量PCR技术检测样品中SeMNPV有效含量

作者：杨和平; 孟小林; 徐进平; 王健; 鲁伟

来源：Virologica Sinica, 2006, (05): 494-498.

• 甜菜夜蛾核型多角体病毒
• 荧光定量PCR
• TaqMan探针 FQ- PCR
• TaqMan-based probe
• SeMNPV

采用NCBI提供的BLAST软件在线检索SeMNPV特异性基因ORF22、ORF40,并将其构建到pMD18-T载体上。以纯化的pMD18-T-ORF22、pMD18-T-ORF40质粒为标准样品,已计数野生型SeMNPV的基因组作对照,用荧光定量PCR检测样品中SeMNPV多角体含量。荧光定量PCR检测得到标准曲线方程为con=10(-0.282CT+9.965)(相关系数:R2=0.9997)和con=10(-0.296CT+9.945)(相关系数:R2=0.9995)。测得一个SeMNPV多角体包含102核酸分子,检测到SeMNPV复合剂包含633PIBs/mg、691PIBs/mgSe...

• 单位
  生命科学学院; 病毒学国家重点实验室; 武汉大学