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摘要
目的 为了以低成本的方法制备出高效价的噬菌体制剂，对副溶血弧菌噬菌体Vpas＿PP24的发酵条件和关键工程化制备工艺进行探索。方法 采用单因素实验法，研究噬菌体Vpas＿PP24发酵体系的不同培养基、金属离子、p H、接种量及培养时间对其效价的影响；在中试规模对优化发酵工艺进行了工程化放大；并以膜过滤结合热除菌法进行了下游工程化噬菌体分离及终端除菌工艺探索。结果 确立了副溶血弧菌噬菌体Vpas＿PP24的最优培养基及最佳发酵条件。摇瓶水平最适出发培养基为2216E液体培养基；Mg2+和Ca2+可促进Vpas＿PP24的增殖，且最适浓度为30 mmol/L；最适p H为8.0;VP8最适接种量为1%；最适培养时间为16 h。在摇瓶水平优化后的效价达到3.0×1010 PFU/mL，较优化前提高了14倍。基于该优化条件，成功将噬菌体发酵放大到50 L中试规模，并建立上游液体深层发酵工程化生产Vpas＿PP24的上游工艺，效价达到3.2×1010 PFU/mL；建立了下游噬菌体除菌工艺，得到效价为2.5×108 PFU/mL的噬菌体Vpas＿PP24批量液体制剂。结论 系统优化了噬菌体Vpas＿PP24的发酵条件，并在中试规模进行了工艺放大，成功建立了中试上游噬菌体发酵工艺、下游噬菌体分离工程化工艺及末端去除宿主菌的技术手段，为噬菌体类替抗产品的工程化生产提供了可参考的范例。
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