铁皮石斛多糖对缺氧/复氧视网膜神经节细胞损伤的影响

作者：肖杨晶; 陈婷^*

来源：中国中医眼科杂志, 2020, 30(09): 613-617.

DOI：10.13444/j.cnki.zgzyykzz.2020.09.002

• 铁皮石斛多糖
• 缺氧/复氧
• 视网膜神经节细胞
• 凋亡

目的探讨铁皮石斛多糖(PDC)对缺氧/复氧损伤视网膜神经节细胞RGC-5的保护作用,并探讨其机制。方法培养RGC-5细胞,造成缺氧/复氧损伤模型,分为对照组、模型组、PDC低浓度组及PDC高浓度组,MTT法观察细胞活性,测各组细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)及细胞超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的变化,流式细胞技术检测RGC-5细胞内活性氧表达,Hoechst33258染色检测凋亡细胞比例,Western blot分析bcl-2及Bax抗体的变化。结果 (1)细胞存活率:模型组较对照组降低(t=19.620,P=0.000),差异有统计学意义。PDC低浓度组(t=4.518,,P=0.002)和PDC高浓度组(t=6.399,P=0.000)均高于模型组,差异具有统计学意义。(2)LDH释放量:模型组较对照组增加(t=25.576,P=0.000),差异有统计学意义。PDC低浓度组(t=13.396,P=0.000)及PDC高浓度组(t=18.446,P=0.000)均低于模型组,差异有统计学意义。(3)SOD水平:模型组较对照组降低(t=21.198,P=0.000),差异有统计学意义;PDC低浓度组(t=7.981,P=0.000)及PDC高浓度组(t=12.007,P=0.000)均高于模型组,差异具有统计学意义。(4)MDA水平:模型组较对照组升高(t=7.461,P=0.000),差异有统计学意义;PDC低浓度组(t=2.865,P=0.021)及PDC高浓度组(t=4.668,P=0.002)均低于模型组,差异具有统计学意义。(5)ROS的表达:对照组ROS主峰位于基线左侧,模型组细胞内ROS表达升高,主峰右移,PDC作用于RGC-5细胞后,细胞内ROS表达下降,ROS主峰逐渐左移。(6)RGC-5细胞凋亡:对照组未见明显凋亡细胞,细胞核均为暗蓝色低荧光;模型组细胞核着色不均匀,凋亡细胞呈亮蓝色高荧光;PDC处理后亮蓝色的凋亡细胞数量逐渐减少。(7)Bcl-2及Bax蛋白表达水平:模型组Bcl-2蛋白相对表达量较对照组降低(t=46.500,P=0.000),差异有统计学意义。PDC低浓度组(t=6.228,P=0.000)和PDC高浓度组(t=6.871,P=0.000)均高于模型组,差异具有统计学意义。模型组Bax蛋白相对表达量较对照组升高(t=7.766,P=0.000),差异有统计学意义;PDC低浓度组(t=5.587,P=0.001)和PDC高浓度组(t=13.864,P=0.000)均低于模型组,差异具有统计学意义。结论 PDC可以抑制缺氧/复氧诱导的RGC-5细胞氧化损伤及凋亡的发生,在预防和治疗视网膜缺血再灌注损伤疾病方面具有一定的应用前景。

• 单位
  哈尔滨医科大学附属第一医院