摘要
为建立血水草的RAPD-PCR最佳反应体系,对影响血水草RAPD反应的Mg2+、模板DNA、dNTPs、引物浓度和Taq聚合酶用量等因素进行优化。结果表明:25μL反应体系中含10×Buffer 2.5μL,1.8 mmol.L-1Mg2+,2UTaqDNA聚合酶,50 ng模板,0.2 mmol.L-1dNTPs,1.6μmol.L-1引物。扩增程序为:94℃预变性2 m in;预扩增:94℃变性20 s,36℃退火30 s,72℃延伸75 s,5个循环;扩增:94℃变性20 s,40℃退火30 s,72℃延伸60 s,40个循环;72℃保温20 m in,4℃保存。所建立的血水草RAPD-...
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