重组Dsg3EC_(1-2)及其嵌合毒素蛋白的原核表达及纯化

作者：翟志芳; 刁庆春; 郝飞; 钟白玉; 唐书谦

来源：中国麻风皮肤病杂志, 2005, (03): 169-171.

• 天疱疮
• 嵌合毒素
• 原核表达
• 金属鏊合亲和层析

目的:在大肠杆菌中高效表达并纯化重组天疱疮抗原桥粒芯糖蛋白3(Dsg3)的胞外结构域EC1-2片段及其与假单胞菌外毒素PE40的嵌合毒素Dsg3EC1-2PE40。方法:在大肠杆菌中对目的蛋白进行诱导表达,并用金属鏊合亲和层析法进行分离纯化,经WesternBlot试验鉴定。结果:所得重组蛋白可以和寻常型天疱疮抗体IgG发生特异性结合,而与正常人IgG不发生反应,其纯化后纯度分别达85%及80%。结论:Dsg3EC1-2片段及其嵌合毒素Dsg3EC1-2PE40在原核细胞中得到成功表达,为天疱疮的治疗研究奠定了基础。

• 单位
  重庆市第一人民医院; 第三军医大学西南医院