摘要
将唾液乳杆菌在有氧条件下进行高密度发酵,检测其活菌数,并以活菌数作为指标研究唾液乳杆菌有氧呼吸的条件,提高活菌数和存活时间,使其更好的适应大规模工业发酵。从实验室保藏菌株中选择乳杆菌GDW1994,并进行16S rDNA测序鉴定,确定为唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)。通过对菌株GDW1994进行酸和H2O2的耐性检测并研究其有氧呼吸发现其呼吸链的激活需要同时外加血红素(heme)和四烯甲萘醌(VK2)。优化后的培养基配方为蛋白胨10 g/L、酵母膏2.5 g/L、葡萄糖20 g/L、牛肉膏15 g/L、无水乙酸钠2 g/L、MgSO4 0.6 g/L、MnSO4·H2O 0.2 g/L。培养温度37℃、接种量4%、pH值6.4、转速为160 r/min、过氧化氢酶质量浓度为30 g/L。随着血红素与四烯甲萘醌的获得及O2的参与,菌株GDW1994在4℃保存可长达30d,活菌数为108 CFU/mL存活率是没有加血红素与四烯甲萘醌和O2参与的100倍是外源过氧化氢酶的20倍。