血管内皮生长因子联合碱性成纤维细胞生长因子改善骨髓间充质干细胞的复制性衰老

作者：施伟丽; 刘珊珊; 常红波; 高海霞; 王新洲; 秦楠; 吴鸿^*

来源：中国组织工程研究, 2023, 1-6.

• 血管内皮生长因子
• 碱性成纤维细胞生长因子
• 骨髓间充质干细胞
• 复制性衰老

背景：间充质干细胞在体外扩增过程中易衰老，极大地阻碍了其体内外应用，如何改善间充质干细胞的复制性衰老，是组织工程学亟待解决的问题。目的：探讨血管内皮生长因子联合碱性成纤维细胞生长因子能否改善复制性传代导致的骨髓间充质干细胞衰老。方法：全骨髓贴壁法提取大鼠骨髓间充质干细胞，选取第2代细胞为正常对照组，第7代及以后代数细胞为衰老模型组，给予血管内皮生长因子(50μg/L)、碱性成纤维细胞生长因子(10μg/L)及二者联合干预。CCK-8法检测细胞增殖情况，β-半乳糖苷酶活性染色观察细胞衰老情况，鬼笔环肽染色和吉姆萨染色分别观察细胞骨架大小及集落形成能力，q RT-PCR检测衰老相关基因P16、P21和P53表达水平。结果与结论：(1)血管内皮生长因子联合碱性成纤维细胞生长因子可促进衰老骨髓间充质干细胞的增殖，第9天开始进入平台期，且第9天联合干预组吸光度值较模型组明显升高(P <0.05)；(2)联合干预组细胞表型标记物未见改变，细胞形态由宽大变细长；(3)与模型组比较，联合干预组β-半乳糖苷酶阳性率显著降低(P <0.01)；细胞核个数增加(P <0.001)；细胞骨架总面积增加(P <0.01)；集落形成能力增强(P <0.05);P16表达水平降低(P <0.01)。以上结果提示：血管内皮生长因子联合碱性成纤维细胞生长因子可改善复制性传代导致的骨髓间充质干细胞衰老，且不改变细胞表型。

• 单位
  中心实验室; 河南省中医院; 第二临床医学院; 河南中医药大学