肠出血性大肠杆菌紧密黏附素保护性多肽的表达与免疫原性分析

作者：高翔; 包士中; 史晶; 蔡昆; 刘昊; 侯晓军; 王慧

来源：军事医学科学院院刊, 2008, (04): 316-318.

• 肠出血性大肠杆菌
• 紧密黏附素
• 免疫原性 enterohemorrhagic Escherichia coli
• intimin
• immunogenicity

目的:在基因工程菌中实现肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7紧密黏附素(intimin)保护性片段(Int281)的高效表达,并进行抗原性的初步分析。方法:应用PCR从EHEC O157∶H7基因组中钓取int281基因,插入pMD18-T克隆载体。克隆质粒测序鉴定后,采用NdeⅠ、NotⅠ限制性核酸内切酶双酶切pMD18-T-int281质粒获得int281基因,连接同样经过双酶切的pET-22b(+)。表达质粒测序鉴定后转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,经SDS-PAGE检测相对分子质量和Western印迹验证免疫学活性后,重组Int281蛋白免疫BALB/c小鼠...

• 单位
  军事医学科学院; 病原微生物生物安全国家重点实验室