鸭坦布苏病毒SYBR Green qPCR检测方法的建立

作者：陈国强; 李永旺; 王凯民; 陈雷; 钱伟; 朱婷; 陆春华; 时长军^*

来源：畜牧与兽医, 2018, 50(09): 78-81.

• 鸭坦布苏病毒
• qPCR
• 灵敏性
• 特异性

通过BLAST比较已公布的鸭坦布苏病毒核酸序列,在其E基因保守区域设计了4对引物,并用鸭坦布苏病毒培养物核酸筛选出最佳的一对引物建立了SYBR Green qPCR。用构建的重组质粒建立标准曲线,扩增效率为90.5%,在2.0×1012.0×108copies/μL范围内具有良好的线性关系,最低检测限为100拷贝/反应。该qPCR方法可以检测5个鸭坦布苏病毒分离株以及WF100活疫苗,灵敏性比文献已发表的其他3对引物高10倍;且特异性很好,不与其他常见禽类病毒交叉反应。由此表明本研究新建了一种高度灵敏和特异的鸭坦布苏病毒的SYBR Green qPCR检测方法。

• 单位
  江苏出入境检验检疫局; 苏州西山生物技术有限公司