摘要

目的研究氢氧化钠(NaOH)与雷帕霉素(Rapa)单独或联合处理对Tsc2基因缺失(Tsc2-/-)小鼠胚胎成纤维细胞的影响。方法将Tsc2-/-细胞及其对照野生型(WT)细胞按照处理方式分为:对照组、NaOH处理组,Rapa处理组和NaOH+Rapa联合(Combo)处理组。采用MTT法检测细胞增殖能力;克隆形成实验检测细胞集落形成能力;流式细胞测量术检测细胞周期;免疫印迹法检测p-4EBP1、p-S6和S6蛋白表达水平。结果与对照组相比,NaOH组和Rapa组的Tsc2-/-细胞均表现为增殖能力降低、克隆形成数减少(P<0.05);仅Rapa组的Tsc2-/-细胞G1期比例升高且p-S6和p-4EBP1的蛋白表达水平降低(P<0.05)。与单独的NaOH组和Rapa组相比,Combo组的Tsc2-/-细胞在增殖能力和克隆形成数量上呈进一步降低,G1期细胞的比例呈进一步升高(P<0.05),p-S6和p-4EBP1的蛋白表达水平低于NaOH组(P<0.05)。结论氢氧化钠(15μmol/L)能增强Rapa抑制Tsc2-/-细胞增殖的效果。

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