猪CD8β分子重组蛋白的表达、纯化与免疫活性鉴定

作者：薛萍; 孙晓林; 王晓霞; 陈国华; 房永祥; 景志忠

来源：甘肃农业大学学报, 2009, (04): 4-9.

DOI：10.13432/j.cnki.jgsau.2009.04.017

• 猪CD8β
• 原核表达
• 纯化
• 活性分析 porcine CD8β(pCD8β)
• prokaryotic expression
• purification
• active analysis

对猪CD8β(pCD8β)基因重组蛋白的表达纯化条件以及免疫活性进行了研究.结果表明:pET-28a-pCD8β重组菌诱导表达产物的分子量约为24 ku,与预计的分子量大小相符.包涵体形式表达的重组蛋白的纯化产物经免疫印迹分析和ELISA检测证实有良好的特异性反应;SDS-PAGE后的目的胶带以直接研磨法和电洗脱纯化法加佐剂分别免疫BALB/c小鼠后,ELISA检测抗原免疫效价均大于1∶6 400,说明本试验对pET-28a-pCD8β纯化的重组蛋白具有良好的免疫原性和反应原性,可以制备CD8β的单克隆抗体.

• 单位
  家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 西北农林科技大学; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 甘肃农业大学