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摘要
目的：基于磷酸二酯酶（PDE）抑制活性，建立清金化痰汤抗炎活性测定方法，补充与完善该经典名方的质量控制体系。方法：采用高效液相色谱法（HPLC）建立PDE活性测定方法，考察清金化痰汤抑制PDE活性的量效关系，流动相甲醇-0.5%乙酸水溶液（5∶95），检测波长254 nm。通过测定多批清金化痰汤水提物冻干粉对PDE的抑制率，以中和酶的活性国际单位U标示其生物活性。结果：选择4 U·m L-1PDE溶液，在反应底物环磷酸腺苷（c AMP）浓度为50μmol·L-1、反应时间为60 min时，酶促反应稳定。在此反应体系下，当清金化痰汤水提物冻干粉终质量浓度为0.11～3.0 g·L-1时，其对PDE的抑制作用呈现浓度依赖性。确定清金化痰汤水提物冻干粉待检质量浓度1 g·L-1，在该质量浓度下对PDE呈显著且稳定抑制作用，抑制率>45%，即1 mg的清金化痰汤水提物冻干粉至少可中和1.8 U PDE的活性。结论：建立了基于PDE抑制活性的清金化痰汤生物活性评价方法，以PDE活性国际单位U表征了清金化痰汤的抗炎活性，可为中药复方生物活性测定研究提供新方法。
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