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摘要
目的探讨加味参苓白术散对不同含糖量腹膜透析液(PDF)诱导腹膜纤维化大鼠腹膜组织病理学改变和细胞外基质(ECM)的影响及其机制。方法将70只雄性SD大鼠按照单纯随机抽样原则分为对照组、不同含糖量PDF模型组及其相应中药干预组, 每组10只。分别腹腔注射含糖量为1.5%、2.5%、4.25%的PDF 100 mL·kg-1·d-1诱导大鼠腹膜纤维化模型, 每日1次, 连续8周;对照组大鼠给予等量生理盐水。各中药干预组大鼠每日于制模后即刻灌胃加味参苓白术散溶液10 mL/kg(每升含2.014 kg生药);各PDF模型组及对照组大鼠灌胃等量生理盐水。8周后, 检测各组大鼠腹膜超滤量。取腹膜组织, 苏木素-伊红(HE)染色后, 光镜下观察壁层腹膜形态学改变及腹膜厚度;Masson染色后, 光镜下观察腹膜胶原纤维沉积情况;采用蛋白质免疫印迹试验(Western blotting)测定腹膜组织中ECM主要成分E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和波形蛋白(Vimentin)的表达;采用免疫组化法检测ECM调控因子基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的阳性表达。结果与对照组比较, 不同含糖量PDF均可诱导大鼠发生腹膜纤维化, 且纤维化程度随含糖量增加而逐渐加重, 表现为腹膜增厚, 胶原纤维沉积增加, 腹膜超滤量减少, 伴随腹膜组织中E-cadherin、MMP-9表达下调, α-SMA、Vimentin、TIMP-1、TGF-β1表达上调, 以4.25% PDF模型组腹膜组织病理学改变及ECM聚积情况更加严重。经加味参苓白术散干预后, 与相应PDF模型组比较, 大鼠腹膜纤维化均得到不同程度改善, 仍以4.25% PDF相应中药干预组效果更为显著, 壁层腹膜明显变薄(μm:101.86±16.01比140.65±10.13, P<0.05), 胶原纤维沉积明显减少, 腹膜超滤量明显增加(mL:-0.01±3.45比-3.53±1.84, P<0.05), 同时腹膜组织中E-cadherin、MMP-9表达明显上调〔E-cadherin蛋白(E-cadherin/β-actin):0.84±0.08比0.28±0.05, MMP-9(A值):0.60±0.15比0.37±0.01, 均P<0.05〕, α-SMA、Vimentin、TIMP-1、TGF-β1表达明显下调〔α-SMA蛋白(α-SMA/β-actin):0.36±0.08比1.05±0.09, Vimentin蛋白(Vimentin/β-actin):0.53±0.07比1.19±0.04, TIMP-1(A值):0.49±0.06比0.87±0.02, TGF-β1(A值):0.67±0.04比0.89±0.10, 均P<0.05〕。结论大鼠腹膜纤维化程度随PDF含糖量增加而逐渐加重;加味参苓白术散对不同含糖量PDF诱导的大鼠腹膜纤维化均有一定改善作用, 其机制与调节纤维化标志物表达及减少ECM聚积有关。
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