摘要
目的探究丹酚酸B对高糖干预下的人肾小管上皮细胞自噬相关蛋白的影响。方法根据人近端肾小管上皮细胞HK-2细胞培养方式的不同,分为对照组、葡萄糖组和实验组,对照组加入5.5mmol/L的葡萄糖;葡萄糖组加入葡萄糖的浓度分为10、20和30mmol/L;实验组在培养基中分别加入丹酚酸B和葡萄糖(30mmol/L),丹酚酸B的浓度分为0.1、1、10和100μmol/L,培养24h。使用蛋白提取试剂盒分别提取3组培养细胞中的总蛋白,采用Bradford法测定不同培养组细胞自噬相关蛋白的含量,进行分析比较。结果随着葡萄糖刺激浓度的增高,p62蛋白表达增加。24h后,高糖可诱导HK-2细胞自噬相关蛋白p62表达增加,LC3表达减少,且呈剂量依赖性。与对照组相比,随着丹酚酸B干预剂量的增高,24h后的细胞LC3的表达增加,不同剂量丹酚酸B干预可减少高糖诱导下的p62蛋白的表达增加,同时LC3的表达得到明显恢复,且呈剂量依赖性(P<0.05)。Logistic回归分析的结果显示,LC3蛋白含量、p62蛋白含量是影响细胞自噬的独立影响因素。结论在高糖的干预下,不同剂量丹酚酸B干预可减少高糖诱导下的p62蛋白的表达增加,同时LC3的表达得到明显恢复,且呈剂量依赖性。
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单位兴化市人民医院; 南京医科大学第二附属医院