血红素加氧酶-1降低RAW264.7巨噬细胞炎症因子表达的线粒体机制研究

作者：高新跃; 冯羽敬; 包蓉; 黄朝朝; 贡瞻; 周宇杰

来源：实用临床医药杂志, 2022, 26(13): 26-29.

• 血红素加氧酶-1
• 线粒体
• 自噬
• 分裂
• 炎症因子
• 活性氧

目的 探讨血红素加氧酶-1(HO-1)抑制RAW264.7巨噬细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、活性氧(ROS)合成的线粒体机制。方法 体外培养RAW264.7巨噬细胞，将其随机分为空白对照组(C组)、内毒素脂多糖(LPS)造模组(CL组)、血红素(Hemin, HO-1诱导剂)+LPS组(HL组)、锌原卟啉-IX(ZnPP-IX, HO-1拮抗剂)+LPS组(ZL组)、3-甲基腺嘌呤(3-MA,线粒体自噬抑制剂)+LPS组(ML组)、雷帕霉素(RAPA,线粒体自噬促进剂)+LPS组(RL组)共6组。采用蛋白质印迹法(Western blot)检测HO-1、TNF-α、IL-1β、微管相关蛋白1A/1B轻链3B(LC3B)、受体裂变蛋白1(FIS1)、线粒体动力蛋白1(DRP1)相对表达量，并使用ROS检测试剂盒检测ROS含量。结果 与C组比较，另5组的HO-1、LC3B、ROS表达量均增加，DRP1表达量均降低，差异有统计学意义(P<0.05);与C组比较，CL组、ZL组和ML组的FIS1表达量均增加，HL组、RL组的FIS1表达量均降低，差异有统计学意义(P<0.05);与C组比较，HL组的IL-1β、TNF-α表达量均降低，差异有统计学意义(P<0.05)。与CL组比较，HL组的LC3B表达量降低，ZL组、ML组和RL组的LC3B表达量均增加，差异有统计学意义(P<0.05);与CL组比较，HL组的TNF-α、IL-1β表达量均降低，RL组的IL-1β表达量增加，TNF-α表达量降低，ML组的TNF-α、IL-1β表达量增加，差异有统计学意义(P<0.05);与CL组比较，HL组、RL组的ROS表达量降低，ZL组、ML组的ROS表达量增加，差异有统计学意义(P<0.05)。HL组的TNF-α、IL-1β、DRP1表达量低于另5组，HO-1表达量高于另5组，差异有统计学意义(P<0.05); RL组的FIS1表达量低于HL组，LC3B表达量高于HL组，差异有统计学意义(P<0.05)。RL组的IL-1β、TNF-α、FIS1、DRP1、ROS表达量低于ML组，LC3B表达量高于ML组，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HO-1可抑制RAW264.7巨噬细胞线粒体分裂而降低炎症因子表达，且效果优于线粒体自噬。

• 单位
  上海市浦东新区浦南医院