摘要
目的探讨钙释放激活钙通道调节分子1(ORAI1)对结肠癌细胞系SW480增殖的影响及其机制。方法以ORAI1干扰慢病毒感染SW480细胞,分别用实时荧光定量PCR和Western blot检测细胞中ORAI1mRNA和蛋白的表达,通过MTT法、集落形成实验和倍增时间检测细胞的增殖,流式细胞仪检测其周期,激光共聚焦显微镜检测细胞钙内流(SOCE),Western blot法检测细胞中ERK1/2、p-ERK1/2和Cyclin D1蛋白表达。结果 SW480转染ORAI1干扰慢病毒72 h后,可见明显的荧光表达;干扰组较空病毒组和对照组,ORAI1的表达降低(P<0.01)、细胞生长减慢(P<0.05)、集落形成能力减弱(P<0.01)、倍增时间延长(P<0.01)、G1期细胞比例增高(P<0.05)、SOCE内流峰值降低(P<0.05)、p-ERK1/2和Cyclin D1的蛋白表达量降低(P<0.01)。结论 ORAI1可能通过SOCE调节胞内Ca2+浓度,并进一步通过MAPK信号通路促进SW480细胞的增殖。
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单位重庆医科大学附属第一医院