牛呼吸道合胞体病毒G蛋白的截短表达与鉴定

作者：冯军科; 薛飞; 李娇; 祖立闯; 朱远茂; 任宪刚

来源：中国生物工程杂志, 2008, (12): 24-29.

DOI：10.13523/j.cb.20081205

• 牛呼吸道合胞体病毒
• G基因
• 克隆
• 表达 Bovine respiratory syncytial virus G gene Cloning Expression

将牛呼吸道合胞体病毒(bovine respiratory syncytial virus,BRSV)G基因截短成2个片段G1和G2,然后以人工合成的牛呼吸道合胞体病毒G基因为模板,利用PCR分别扩增G1和G2基因片段,其大小分别为570 bp和308 bp。将目的片段定向克隆到pET30a表达载体,酶切及测序鉴定均正确后,转化BL21表达菌,经IPTG诱导后G1和G2基因片段均获得了表达,且为可溶性表达。利用Ni柱亲和层析法在非变性条件下纯化重组蛋白,经免疫印迹试验鉴定证明纯化的重组蛋白G1具有良好的抗原性和特异性,而重组蛋白G2无反应性。应用纯化的重组蛋白G1进行的间接ELISA与免疫印迹...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室