丙型肝炎病毒感染促进53BP1蛋白通过泛素-蛋白酶体途径降解的研究

作者：周亚莉; 何玉林; 乔冠华; 金科; 覃培芳; 黄海涛; 闫建国^*

来源：中国病原生物学杂志, 2022, 17(08): 869-879.

DOI：10.13350/j.cjpb.220801

• 肝细胞癌
• 丙型肝炎病毒
• 53BP1
• 泛素-蛋白酶体降解

目的 探讨丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus, HCV)对53BP1表达的影响及机制。方法 建立HCV体外感染Huh7细胞模型，采用Western blot检测HCV感染对53BP1总蛋白、胞浆和胞核蛋白表达的影响，qPCR检测53BP1的mRNA表达，采用免疫荧光(Immunofluorescence, IF)方法检测HCV感染对53BP1亚细胞定位的影响；采用免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)法定量检测HCV相关肝癌中53BP1蛋白的表达，并与癌旁组织及正常肝脏相比较；采用免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation, CO-IP)方法检测HCV对53BP1蛋白泛素化水平的影响。结果 HCV感染导致Huh7细胞53BP1蛋白的相对表达水平为(0.41±0.03),明显低于对照组(1.00±0.08),差异有统计学意义(P<0.01);在HCV感染后，胞核53BP1蛋白相对表达水平为(0.35±0.03),明显低于对照组(1.00±0.09),差异有统计学意义(P<0.01);而胞浆53BP1相对表达水平为(1.20±0.18),对照组相对表达水平为(1.00±0.17),两者表达无显著改变(P>0.05);HCV感染可导致53BP1蛋白，尤其是胞核53BP1蛋白的表达下降。免疫荧光结果显示HCV感染导致53BP1从胞核到胞浆的亚细胞定位改变；免疫组化结果显示，与正常肝脏相比，53BP1在HCV相关HCC的癌组织(P<0.01)和癌旁组织(P<0.05)中显著降低。机制分析表明HCV感染促进53BP1的泛素-蛋白酶体途径降解。结论 HCV感染可致Huh7细胞53BP1发生由细胞核到细胞质的定位改变，并促进其通过泛素-蛋白酶体途径降解。

• 单位
  基础医学院; 桂林医学院