本发明公开了一种化学发光信号时间和空间二维分辨型检测装置和检测方法,所述检测装置包括可实现化学发光信号时间和空间二维分辨的微流控纸芯片、用于发光检测的暗盒以及摄像装置。本发明检测装置不仅能对样品进行多通道、可视化、时间和空间分辨型检测,此外,不同反应孔的发光信号在不同时间和不同空间出现,通过空间分辨结合时间分辨,可有效克服不同检测通道之间发光信号之间的干扰和相互影响,提高检测结果准确性,特别适合于具有相似物理化学性质的目标分析物的检测。