S/D残留量对SARS-CoV-2假病毒中和抗体检测方法的影响

作者：王萌; 张黎; 李倩倩; 吴佳静; 郝焕; 孙其玉; 聂建辉; 黄维金

来源：药物分析杂志, 2020, 40(04): 613-619.

DOI：10.16155/j.0254-1793.2020.04.05

• 2019冠状病毒病
• 严重急性呼吸综合征冠状病毒2
• 假病毒
• 病毒灭活
• 中和抗体
• 恢复期血浆

目的:评价有机溶剂/表面活性剂（solvent and detergent,S/D）法灭活后S/D残留量对严重急性呼吸综合征冠状病毒2（SARS-Co V-2）的假病毒中和抗体检测方法（pseudotyped virus based neutralization assay,PBNA）的影响。方法:在严重急性呼吸综合征（severe acute respiratory syndrome,SARS）和2019冠状病毒病（coronavirus disease,COVID-19）患者恢复期血浆中加入0.1～10倍《中华人民共和国药典》（简称《中国药典》）规定残留标准[100μg·m L-1聚山梨酯80（吐温80）+10μg·m L-1磷酸三丁酯（TNBP）]浓度的S/D,模拟灭活后S/D残留量。用PBNA检测加入S/D前后的中和抗体水平,比较S/D对中和方法的影响。将不同浓度的S/D加入到SARS-Co V和SARS-Co V-2假病毒中进行灭活处理1、2和6 h,检测假病毒的滴度,评价S/D对冠状病毒假病毒的灭活效果。结果:当S/D残留低于《中国药典》残留上限(100μg·m L-1吐温80+10μg·m L-1 TNBP)时,SARS-Co V-2中和抗体EC50平均值与无S/D组的PBNA检测结果无统计学差异;当S/D残留大于2.5倍《中国药典》残留标准时,S/D对PBNA有显著影响。含有10 mg·m L-1吐温80+1 mg·m L-1 TNBP的S/D试剂,室温静置1 h即可以灭活SARSCo V和SARS-Co V-2假病毒,假病毒滴度下降分别达到5.11和4.80 log滴度,其灭活效果随着S/D的浓度下降而下降,S/D浓度为1%时无灭活效果。结论:S/D残留量对SARS-Co V-2的PBNA有显著影响,为保障PBNA的检测准确性,血浆中S/D残留量应不超过《中国药典》规定的标准,S/D试剂具有灭活2种冠状病毒假病毒的作用。

• 单位
  中国食品药品检定研究院