PLAGL2基因siRNA表达质粒的构建及体外干扰作用

作者：邓飞涛; 柴新群; 叶伦

来源：华中科技大学学报(医学版), 2009, 38(05): 598-601.

• RNA,小分子干扰
• PLAGL2
• SP-C
• SP-B
• H441细胞

目的构建PLAGL2 siRNA表达载体质粒并探讨其体外干扰作用。方法构建的PLAGL2 siRNA表达载体质粒经脂质体介导转染到小鼠肺Ⅱ型上皮细胞株H441细胞中并获得稳定细胞株,采用实时荧光PCR及Westernblot技术分别检测转染组和野生型H441细胞中PLAGL2、SP-C、SP-B mRNA和PLAGL2蛋白表达水平的变化。结果实时荧光PCR检测结果显示:与野生型H441细胞相比较,PLAGL2 siRNA表达载体质粒转染的H441细胞中PLA-GL2 mRNA水平明显降低(P<0.05),SP-C mRNA水平明显增高(P<0.05),而SP-B mRNA水平没有明显差异(P>0.05);Western blot检测结果显示:与野生型H441细胞相比较,PLAGL2 siRNA表达载体质粒转染的H441细胞中PLAGL2蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论成功构建了PLAGL2 siRNA表达载体,将其转染至H441细胞中可有效抑制PLAGL2基因的表达,同时促进SP-C基因的表达。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院