重组乙肝疫苗纯度高效液相色谱法的研究与应用

作者：周志平; 韩斌^*; 董洁

来源：生物技术, 2020, 30(05): 453-518.

DOI：10.16519/j.cnki.1004-311x.2020.05.0072

• 高效液相色谱法
• 乙型肝炎病毒
• 重组乙型肝炎疫苗
• 纯度
• 乙肝表面抗原

[目的]建立检测重组乙肝疫苗(汉逊酵母)纯度的高效液相色谱法(HPLC)。[方法]采用TSK gel G5000PW色谱柱,优化流动相、流速、柱温及p H等参数,确定最佳试验条件;并与TSK gel G3000SW色谱柱检测乙肝纯度的方法进行比较。[结果]确定了最佳试验条件:流动相为0. 01 mmol/L PB(磷酸缓冲液),流速为0. 6 m L/min,柱温为室温(20℃),p H为7. 0,检测波长280 nm;乙肝表面抗原(HBs Ag)在色谱柱TSK gel G5000PW和TSK gel G3000SW的保留时间分别为8. 5 min、17. 5 min;检测时间分别为20 min、40 min。[结论]建立的HPLC方法专属性、重复性良好,更省时、高效,可用于HBs Ag的纯度检测。