摘要
目的观察原花青素抑制宫颈癌HeLa细胞的上皮间质转化的作用,为临床新的治疗宫颈癌方案奠定基础。方法采用MTT法检测原花青素对HeLa细胞的IC50,划痕和Transwell实验观察药物抑制宫颈癌细胞侵袭和迁移的作用,免疫荧光观察宫颈癌细胞EMT(上皮间质转化)生成相关蛋白在药物作用后改变情况,Western blot检测TGF-β1(转化生长因子-β1)、E-cadherin(上皮钙黏蛋白)等EMT相关蛋白在药物干预下的改变及在药物作用下Smad2、Smad3及其磷酸化的作用和Smad7蛋白表达,qPCR检测药物联合Smad通路抑制剂SB431542后E-cadherin mRNA表达变化。结果原花青素可抑制HeLa细胞的增殖。与对照组比较,原花青素组可抑制细胞侵袭和迁移。免疫荧光发现,原花青素作用后与EMT相关的TGF-β1、E-cadherin蛋白表达发生显著改变。Western blot结果显示,HeLa细胞EMT相关蛋白在原花青素干预下TGF-β1、E-cadherin、pSmad2、pSmad3、Smad7均发生显著变化,但对Smad2和Smad3蛋白的作用无统计学意义(P>0.05),在Smad通路抑制剂SB431542作用下原花青素对E-cadherin作用效果下降,提示原花青素通过Smad通路抑制细胞EMT的形成。结论原花青素对HeLa细胞EMT的生成有抑制作用,可抑制细胞侵袭和迁移,其作用机制与TGF-β1介导的Smad依赖性通路有关。
-
单位江苏卫生健康职业学院; 无锡市锡山人民医院