异烟肼致肝细胞损伤中GSTP1启动子区甲基化

作者：牛琛; 李金凤; 李莹淑; 张一杨; 李玉红; 王悦; 田慎谦; 任琦; 郑国颖; 冯福民

来源：国际药学研究杂志, 2017, 44(10): 965-969.

DOI：10.13220/j.cnki.jipr.2017.10.011

• 肝损伤
• GSTP1
• DNA甲基化
• DNA甲基转移酶

目的通过异烟肼损伤HL-7702肝细胞,探索谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)启动子区Cp G岛甲基化与损伤的关系。方法将细胞分为对照组与不同浓度异烟肼(200、400和800 mg/L)处理组,采用比色法检测HL-7702细胞外乳酸脱氢酶(LDH)活性水平;采用实时荧光定量PCR分别检测各组3种DNA甲基转移酶(DNMT)DNMT1、DNMT3a、DNMT3b和GSTP1的m RNA表达;采用酶联免疫法(ELISA)检测3种DNA甲基转移酶蛋白表达;采用亚硫酸盐修饰后测序法(BSP)检测GSTP1启动子区Cp G岛的甲基化水平。结果异烟肼处理细胞上清液中LDH活性水平升高,细胞损伤程度随异烟肼浓度升高而加剧。与对照组比较,400和800 mg/L异烟肼组GSTP1 m RNA表达随异烟肼浓度增加而显著升高(P<0.05,P<0.01),异烟肼高剂量组GSTP1启动子区Cp G岛甲基化较对照组降低。3种DNMT蛋白表达水平随异烟肼浓度增加表达升高,高剂量异烟肼组的3种DNA甲基转移酶m RNA和蛋白表达较对照组均显著性增强(P<0.01)。结论异烟肼损伤的肝细胞HL-7702的GSTP1启动子区Cp G岛呈低甲基化。

• 单位
  华北理工大学