转染微小RNA-146a对肺泡巨噬细胞肿瘤坏死因子-α表达的影响

作者：刘芬; 曾振国; 聂成; 丁成志; 邵强; 卿城; 钱克俭

来源：中华危重病急救医学, 2013, (06): 335-338.

• 微小RNA-146a
• 肺泡巨噬细胞
• 肿瘤坏死因子-α

目的观察转染微小RNA-146a(miR-146a)对大鼠肺泡巨噬细胞炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响,探讨转染miR-146a对肺泡巨噬细胞炎症反应的调控作用。方法体外培养大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383,分别以25、50、100 nmol/L Cy~(TM)3标记的Pre-miR~(TM)阴性对照转染细胞,选择转染效率最高的浓度作为实验浓度。将NR8383细胞分成两组,转染组转染50 nmol/L Pre-miR~(TM)miR-146a前体,对照组转染50 nmol/LCy~(TM)3标记的Pre-miR~(TM)阴性对照,采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测转染后细胞内miR-146a的mRNA表达。用脂多糖(LPS)1 mg/L刺激细胞6 h后,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞培养上清液内TNF-α蛋白表达,采用RT-qPCR检测细胞内TNF-αmRNA表达。结果以50 nmol/LCy~(TM)3标记的Pre-miR~(TM)阴性对照转染细胞效率最高,约为80%。与对照组(作为1)相比,转染组细胞内miR-146a的mRNA表达上调了(24.55±6.14)倍(P<0.01)。LPS刺激后,转染组细胞上清液TNF-α蛋白含量(ng/L)较对照组明显下降(211.5±30.4比616.6±42.3,P<0.01),细胞内TNF-αmRNA表达下调了(47±6)%(P<0.05)。结论转染miR-146a能下调肺泡巨噬细胞炎症因子TNF-α的表达,表明miR-146a能抑制LPS诱导肺泡巨噬细胞的炎症反应。

• 单位
  南昌大学第一附属医院