HO-1修饰的BMMSCs联合常温机械灌注对肝移植急性排斥反应Brown Norway大鼠肠道屏障功能的影响

作者：林玲; 袁梦淑; 吴龙龙; 田轩; 郑卫萍; 曹欢; 宋红丽^*

来源：中华肝胆外科杂志, 2022, 28(03): 210-215.

• 肝移植
• 骨髓间充质干细胞
• 常温机械灌注
• 急性排斥反应
• 肠道屏障

目的分析血红素加氧酶-1(HO-1)修饰的骨髓间充质干细胞(BMMSCs)联合常温机械灌注(NMP)对肝移植急性排斥反应大鼠肠道屏障功能的影响。方法无特定病原体4～5周龄、40～60 g雄性Brown Norway(BN)大鼠2只提取BMMSCs, 通过腺病毒转导HO-1;24只7～8周龄、200～220 g雄性Lewis大鼠为供体, 30只8～9周龄、220～240 g雄性BN大鼠为受体, "二袖套"法建立原位肝移植急性排斥反应模型。BN大鼠随机分为5组:Sham组仅开腹关腹;NMP组供肝NMP 4 h;BMP组供肝NMP 4 h+门静脉灌注BMMSCs;HBP组供肝同BMP组, 但灌注HO-1/BMMSCs;FK506组供肝NMP 4 h, 肝移植术后灌胃他克莫司, 每组6只。术后第14天取材检测并计算排斥活动指数(RAI), HE染色及透射电镜分别观察肠道病理改变和超微结构, Western印迹检测肠道组织紧密连接蛋白表达, 酶联免疫吸附法检测血清脂多糖、D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)。结果 HBP组、FK506组RAI为(2.80±0.84)分、(2.20±0.84)分, 显著低于NMP组(7.60±1.14)分、BMP组(6.00±1.58)分, 差异均有统计学意义(均P<0.05)。肠道HE染色NMP组肠绒毛明显稀疏、皱缩, 排列杂乱, BMP组、HBP组、FK506组较NMP组肠道损伤程度减轻。电镜观察HBP组肠上皮细胞微绒毛丰富且排列整齐, 细胞间紧密连接结构完整。Western印迹检测闭锁小带-1相对表达, HBP组(0.87±0.06), 高于NMP组(0.41±0.12)和FK506组(0.52±0.15);闭合蛋白相对表达HBP组(1.28±0.26), 高于NMP组(0.27±0.18)和FK506组(0.63±0.22), 差异均有统计学意义(均P<0.05)。HBP组血清脂多糖、D-乳酸和DAO浓度均低于NMP组、FK506组, 差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 HO-1/BMMSCs联合NMP可以保护肝移植术后急性排斥反应BN大鼠的肠道屏障功能。

• 单位
  天津医科大学; 南开大学; 天津市第一中心医院