土鳖虫调控黏结合蛋白聚糖3改善非酒精性脂肪性肝炎的作用机制

作者：杨广越; 陶乐; 张玮; 刘旭凌; 马文婷; 吴柳; 孙田甜; 姜浩; 刘成^*

来源：临床肝胆病杂志, 2022, 38(07): 1513-1520.

• 土鳖虫
• 非酒精性脂肪肝炎
• 多配体蛋白聚糖3

目的 探讨土鳖虫调控黏结合蛋白聚糖3(SDC3)对胆碱缺乏(CDAA)诱导的非酒精性脂肪性肝炎的作用及其机制。方法 18只雄性C57BL/6小鼠随机分为胆碱充足(CSAA)组、CDAA组和胆碱缺乏加土鳖虫(CDAA+T)组。造模第12周开始,CDAA+T组小鼠给予0.108 g/kg土鳖虫(相当于成人用量10倍量)灌胃,CSAA、CDAA组以等体积生理盐水灌胃,18周末取血清和肝组织，检测小鼠肝功能、TC和TG,观测肝组织病理形态学。实时定量PCR检测转化生长因子(TGF)β1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(Col1α1)、SDC3 mRNA表达；检测SDC3在人和小鼠原代肝细胞、肝星状细胞(HSC)、内皮细胞和Kupffer细胞中的表达，应用Si-RNA沉默SDC3,检测SDC3在HSC活化中的作用。蛋白免疫印迹法检测SDC3蛋白表达。计量资料多组间比较采用单因素方差分析，组内进一步两两比较采用SNK或LSD-t检验。结果 与CSAA组相比,CDAA组肝功能(ALT、AST)、血清和肝脏TC、TG水平显著升高(P值均<0.01),CDAA+T组小鼠血清ALT、AST、TC、TG水平较CDAA组均显著下降(P值均<0.05)。HE染色显示CDAA组脂肪变明显，炎症细胞浸润增多,CDAA+T组炎症细胞浸润减轻；天狼星红染色显示CDAA组胶原增生显著增加,CDAA+T组胶原增生则减少；油红染色中CDAA组脂肪沉积明显，而CDAA+T组脂肪沉积减少。与CDAA组相比,CDAA+T组肝组织TGFβ、SDC3、α-SMA、COL1α1的mRNA表达和SDC3、α-SMA蛋白表达水平显著降低。免疫组化结果显示:SDC3在CSAA组中表达非常低, CDAA组中SDC3表达显著升高，主要在间质细胞，土鳖虫干预后表达显著降低(P值均<0.05)。PCR结果显示：人和小鼠肝脏各类型细胞中SDC3在HSC细胞表达最高(P值均<0.001)。体外培养LX2细胞，土鳖虫处理能显著降低TGFβ诱导的α-SMA、Col1α1上调，基因沉默SDC3后，土鳖虫不能抑制α-SMA、Col1α1升高(P值均<0.05)。结论 土鳖虫显著改善CDAA诱导的非酒精性脂肪性肝炎，其机制可能通过调控HSC中SDC3表达实现的。

• 单位
  上海中医药大学