HER2靶向重组截短型Bid片段融合蛋白对骨肉瘤细胞的促凋亡作用

作者：纪振钢; 裘秀春; 杨彤涛; 龙华; 马保安; 周勇; 张明华; 许彦鸣; 杨安钢; 范清宇

来源：医学研究生学报, 2007, (02): 120-122+127+225.

DOI：10.16571/j.cnki.1008-8199.2007.02.003

• 截短型Bid片段
• 人上皮细胞生长因子受体2
• 融合蛋白
• 骨肉瘤SOSP-9607细胞
• 细胞凋亡

目的:观察人上皮细胞生长因子受体2(HER2)靶向重组的活性截短型Bid(tBid)融合蛋白对骨肉瘤SOSP-9607细胞的促凋亡作用。方法:将抗HER2单链抗体基因e23sFv、与绿脓杆菌外毒素(PE)的转膜结构域基因(PEII)和tbid基因连接,构建成immuno-tbid(e23sFv-PEII-tbid)基因,将其克隆入真核表达载体pCMV中,转染SOSP-9607细胞,间接免疫荧光法检测目的蛋白表达和细胞形态学变化,通过AnnexinⅤ染色、流式细胞仪检测观察其促凋亡作用。结果:转染SOSP-9607细胞后,间接免疫荧光染色检测出tB id的表达,SOSP-9607细胞出现明显的固缩,核浓缩等凋亡特征。AnnexinⅤ染色、流式细胞仪检测可见明显的凋亡细胞,凋亡率为42%,对照组细胞仅6%,表明细胞膜表面有磷脂酰丝氨酸外翻,提示重组immuno-tbid基因表达后有促凋亡作用。结论:重组immuno-tbid基因可在转染的SOSP-9607细胞中表达,并诱导其细胞凋亡。

• 单位
  第四军医大学