摘要

为阐明ATP对肉中糖酵解酶(糖原磷酸化酶、醛缩酶、磷酸丙糖异构酶)磷酸化和乙酰化的影响,以宰后1 h羊背最长肌为试验材料制备肌肉匀浆液,分别添加0、20、50、100 nmol·mg-1蛋白的ATP,构建对照组和低、中、高ATP含量组,在4℃条件下孵育0、1、3、6、12和24 h。采用SDS电泳、蛋白质免疫沉淀、免疫印迹等技术分析ATP和乳酸含量,糖原磷酸化酶、醛缩酶、磷酸丙糖异构酶的磷酸化、乙酰化水平及酶活性变化。结果表明,不同ATP含量处理组的ATP含量显著高于对照组(P<0.05),低ATP含量组的乳酸含量在孵育0~3 h显著低于对照组(P<0.05)。糖原磷酸化酶乙酰化水平、醛缩酶和磷酸丙糖异构酶磷酸化水平分别在孵育0~3、3和0~1 h显著高于对照组(P<0.05)。低、中、高ATP含量组糖原磷酸化酶活性分别在孵育0~1、0~3和0~6 h显著高于对照组(P<0.05)。不同ATP含量组醛缩酶活性在孵育1~6 h显著高于对照组(P<0.05)。低、中、高ATP含量对磷酸丙糖异构酶活性的促进作用分别在1、3、6 h达到最高。综上,添加ATP可在孵育早期通过调控磷酸化和乙酰化修饰促进糖酵解酶活性的提高。本研究结果为宰后早期肌肉中糖酵解酶翻译后修饰及能量代谢相关研究提供了一定的理论基础。