人乳头瘤病毒52型病毒样颗粒制备及其生物活性

作者：郭晶; 刘伟; 董雪; 孙博; 吴丛梅; 殷玉和^*

来源：生物技术, 2019, 29(02): 127-139.

DOI：10.16519/j.cnki.1004-311x.2019.02.0023

• 人乳头瘤病毒52型
• L1蛋白
• 可溶性表达
• 类病毒颗粒

[目的]利用大肠杆菌系统表达人乳头瘤病毒52型(HPV52) L1蛋白,并获得HPV52病毒样颗粒(VLPs)。[方法]优化并合成HPV52L1基因,构建p ET-30a-52L1表达载体粒,转化大肠杆菌E. coli BL21 StarTM(DE3)。经IPTG诱导表达,阳离子交换层析纯化,SDS-PAGE和Western Blotting鉴定,BALB/c小鼠免疫2次,初次后4w检测免疫血清中HPV52中和抗体滴度。[结果]获得纯度90%的HPV52L1蛋白,将获得的HPV52L1蛋白进行解组装和重组装形成VLPs,动态光散射观察到粒径约为70nm,透射电镜观察到50～60nm的均一VLPs,中和抗体滴度达25600。[结论]大肠杆菌系统表达人乳头瘤病毒52型(HPV52) L1蛋白,并经过一步柱层析纯化获得纯度达90%的L1蛋白,经解组装重组装获得粒径大小为50～60nm的VLPs,具有良好免疫原性。

• 单位
  长春工业大学; 生命科学学院; 吉林大学