Microdystrophin基因重组腺病毒的构建及转染mdx骨髓间充质干细胞的表达

作者：熊符; 张成; 肖少波; 李美山; 王淑辉; 于美娟; 尚延昌

来源：生物工程学报, 2007, (01): 27-32.

DOI：10.13345/j.cjb.2007.01.006

• 腺病毒载体
• Microdystrophin
• Mdx鼠间充质干细胞
• DMD Adenovirus vector
• Microdystrophin
• Mdx MSCs
• DMD

构建含有人microdystrophin基因的重组腺病毒,来感染dystrophin基因敲除小鼠mdx的骨髓间充质干细胞(MSC)进行基因修饰,为同种异体基因修饰的干细胞移植治疗DMD疾病奠定基础。用NotⅠ酶切含microdystrophin基因的pBSK-MICRO质粒,获得microdystrophin基因。片段回收后定向插入腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV,获得重组质粒pShuttle-CMV-MICRO。PmeⅠ线性化重组质粒pShuttle-CMV-MICRO,去磷酸化后回收后与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1共电转化BJ5183感受态细胞。同源重组后用选择性培养基筛选阳性克...

• 单位
  华中农业大学; 农业微生物学国家重点实验室; 中山大学; 中山大学附属第一医院